Вирусолог и биофизик из Университета Рокфеллера, используя специальный микроскоп, который может эффективно наблюдать поверхность клетки, впервые в режиме реального времени смогли наблюдать самосборку единичной частицы вируса ВИЧ.
Новая работа может не только оказаться полезной для разработки методов лечения смертельного вируса, но и изменить представления исследователей о способах образования и развития смертельного вируса.
Нолвенн Жувене (Nolwenn Jouvenet), работавший над проектом под руководством эксперта по изучению ВИЧ Пауля Виенажа (Paul Bieniasz) и биофизика по проблемам клетки Санди Симона (Sandy Simon), разрабатывавший методику отслеживания вируса с 1992 года, отмечает, что стало возможным наблюдать непосредственно рождение вируса и ответить на до сих пор открытые вопросы вирологии и биологии.
В отличие от классического микроскопа, «просвечивающего» всю клетку, использованная методика представляет собой микроскопию интернального отражения (internal reflection microscopy), что позволяет осветить лишь поверхность клетки, на которой происходит самоорганизация вируса.
Когда луч света проходит через клетку, он освещает всю клетку, однако более крутой угол падения света приводит к тому, что свет отражается от поверхности клетки, освещая лишь те процессы, которые протекают практически лишь на внешней мембране клетки. Исследователи были первыми, кто определил, что для самоорганизации вириона ВИЧ требуется пять или шесть минут, до этого даже не было идей, в течение какого времени протекает эта самосборка – за миллисекунды или часы.
Чтобы доказать то, что происходит наблюдение именно самосборки нового вируса на поверхности клетки (а не присоединение к ней уже готового вируса), исследователи пометили главный белок вируса (Gag protein) флуоресцирующими функциональными группами. Несмотря на то, что вирион образуется многими компонентами, Gag protein – единственный белок, необходимый для самосборки вируса ВИЧ. Введение флуоресцентных меток позволило подтвердить факт то, что на поверхности мембраны клетки исследователи наблюдали образование нового вируса.